Kısıtlama sindiriminin ürünü kolayca saklanabilir -20 C'de. 4 C'de iyi olur ama hiçbir aktivite ve yıldız aktivitesi olmamasını sağlamak -20 C'de tutulması önerilir.
Sindirilmiş DNA'yı nasıl saklarsınız?
Jel dilimini gece boyunca buzdolabında saklamayı, hatta dilimi tamponda eritip -20°C veya -80°C'de dondurmayı deneyin. DNA'nın bozunması, çözünür DNA ile aynı hızda ve aynı koşullar altında gerçekleşecektir, bu nedenle daha uzun süre saklamak için daha soğuk bir sıcaklık kullanın.
Plazmitin sindirilmesi ne anlama gelir?
Saflaştırılmış plazmit DNA, elektroforez ile kolayca çözülen ayrı bir DNA bant modeli vermek üzere seçilen 1 veya daha fazla kısıtlama enzimi (RE'ler) ile sindirilir. … Çoklu klonlama bölgesi (MCS) içinde kesilen ve 2-5 kolay çözülebilen banttan oluşan bir tanı modeliyle sonuçlanan kısıtlama enzimleri tipik olarak seçilir.
Linearized plazmitleri nasıl saklarsınız?
TE'nin aşağı yönde etkilerinden endişe ediyorsanız, DNA'yı daha yüksek bir konsantrasyonda saklayın ve gerektiğinde seyreltin veya 10 mM Tris / "düşük TE" kullanın. 0.1 mM EDTA. DNA veya RNA temiz olduğunda -20C'de aylarca bozulmadan saklanabilir.
Kısıtlama özetini ne kadar süre saklayabilirsiniz?
Pro-Tip Uygulamaya ve reaksiyondaki DNA miktarına bağlı olarak, inkübasyon süresi 45 dakika ile bir gece arasında değişebilir. Tanısal özetler için 1-2 saat genellikle yeterlidir. Klonlama için kullanılan >1 µg DNA içeren sindirmeler için en az 4 saat sindirmeniz önerilir.