Geçmiş yıllarda Coriell, yeni doğan buzağı serumunda bulunan kompleman proteinini etkisiz hale getirmek için hücre kültürleri için tüm ısıyla inaktive edilmiş serumları kullandı. Fetal sığır serumuna geçtiğimiz için, çoğu hücre hattı için ısı inaktivasyonunun gerekli değil olduğunu görüyoruz.
FBS'yi ne kadar süre ısıtarak etkisiz hale getiriyorsunuz?
Fetal sığır serumunun (FBS) ısıyla inaktivasyonu için aşağıdaki protokol önerilir. FBS, çalkalayıcı su banyosunda 30± 2 dakika için 56± 2°C'ye ısıtılır. Isı İnaktivasyonu (HI) – FBS'nin 30± 2 dakika boyunca 56± 2° sıcaklıkta tutulduğu bir süreç.
Kullanmadan önce FBS için ısıyla inaktivasyon neden gereklidir?
FBS'nin yaygın bir tedavisi, FBS'nin bir su banyosunda ara sıra çalkalanarak 56°C'de 30 dakika ısıtıldığı ısıyla inaktivasyondur. Amaç, FBS [24]'te bulunan kompleman sisteminin bileşenlerini ve hücre büyümesinin diğer potansiyel bilinmeyen inhibitörlerini etkisiz hale getirmektir.
Neden inaktive serumu ısıtmanız gerekiyor?
Isı inaktivasyonunun amacı, ürünün büyüme destekleyici özelliklerini etkilemeden serumdaki kompleman aktivitesini yok etmektir. Kompleman aktivitesinin serumdan çıkarılması çoğu hücre kültürü için gerekli değildir, ancak kompleman aktivitesine duyarlı kültürler için gerekli olabilir.
Isı inaktive edilmiş FBS'yi nasıl saklarsınız?
Çözdürülmüş FBS'yi ve diğer serumları güvenli soğutma vedepolamak. Çözülmüş serumu hemen kullanın. Sıvı FBS ve diğer serumlar buzdolabında (2 ila 8 °C) saklanabilir dört haftaya kadar.
