Ancak, emisyon spektrumları çakıştığında, birden fazla florokromdan gelen floresan algılanabilir. Bu spektral örtüşmeyi düzeltmek için bir floresan telafisi süreci kullanılır. Bu, belirli bir dedektörde algılanan floresansın, ölçülen florokromdan elde edilmesini sağlar.
Akış sitometrisinde neden kompanzasyona ihtiyacımız var?
Flüoresansın fiziği nedeniylebir akış sitometri deneyi için kompanzasyon gereklidir. Bir florokrom uyarılır ve çeşitli dalga boylarında bir foton yayar. Bu fotonların bazıları ikinci bir dedektöre dökülerek tek lekeli numunelerin çift pozitif görünmesine neden olur.
Telafi edici hücre kullanmanın asıl amacı nedir?
Birincil amaç komşu floroforlardan gelen yayılma ile kirlenmiş birincil kanaldaki gerçek floresansın ölçülmesine izin vermektir. Bu nedenle, kompanzasyon, floroforlar arasındaki floresan "geçişini" düzeltir. Ancak, mükemmel değildir ve tüm istenmeyen etkileri gideremez.
Telafi matrisi nedir?
Bir kompanzasyon matrisi, tüm kanallar toplanmış ve parlak alan aydınlatması veya SSC yokluğunda ImageStream veya FlowSight üzerinde toplanan tek renkli floresan kontrol dosyaları kullanılarak hesaplanır.
Spektral telafi nedir?
Spektral kullanmakompanzasyon, birincil olmayan dedektörlerden gelen sinyalinin, mümkün olduğunda işaretçilerin gerçek sinyalini geliştirmek için hala kullanıldığı anlamına gelir. Birincil kontrol örnekleri, parametre adlandırma için kullanılır. … Birincil dedektörler için kullanılan örnekler, spektral kompanzasyondan sonra bu parametreleri adlandırmaya da yardımcı olur.
